草莓是營(yíng)養(yǎng)豐富、栽培廣泛、深受人民喜愛的多年生草本果樹。 近年來(lái),各地生產(chǎn)中急需大批優(yōu)良草莓苗,但采用常規(guī)苗木繁殖,繁殖系數(shù)較低,成本較高,現(xiàn)多采用組培技術(shù)繁殖草莓苗。 本研究通過(guò)草莓
莖尖組織培養(yǎng),對(duì)草莓進(jìn)行了試管苗快速繁殖試驗(yàn),從而為草莓工廠化苗木繁殖打下基礎(chǔ)。
一、母株選擇
建立無(wú)菌株系中, 篩選母株是十分重要的工作,它關(guān)系到大量試管苗的質(zhì)量問(wèn)題。 母株應(yīng)選擇健康且已達(dá)到生育期的植株。 改善供試母株環(huán)境條件也是外植體成活的一個(gè)因素, 快繁用的母株必須保持在適于新梢繼續(xù)萌發(fā)的條件下生長(zhǎng), 這樣才有利于外植體生長(zhǎng)。 為此,必須有一個(gè)帶補(bǔ)充光照裝置的溫室,以滿足草莓生長(zhǎng)需要,并調(diào)節(jié)光質(zhì)和溫度,從而影響植株代謝,進(jìn)而影響植物激素產(chǎn)生。
二、外植體表面消毒
取 1 毫米長(zhǎng)未生根的幼嫩匍匐莖作為外植體,草莓對(duì)各種消毒劑特別敏感,尤其是乙醇。 消毒液濃度稍高,處理時(shí)間稍長(zhǎng),則造成外植體大量死亡,而處理過(guò)輕則會(huì)造成大量污染。 通過(guò)多次試驗(yàn),最終確定了最佳消毒方法, 即 70%乙醇 10 秒+無(wú)菌水沖洗1 次+0.1%升汞 8 分鐘+無(wú)菌水沖洗 5 次。 這種消毒方法污染率低,成活率高,恢復(fù)生長(zhǎng)快。
三、外植體增殖
要使停止增殖的莖尖組織進(jìn)入分化, 形成愈傷組織,需要一定的外源激素作用和培養(yǎng)條件的調(diào)節(jié)。對(duì)于成功的組織培養(yǎng)繁殖來(lái)說(shuō), 增殖率是一個(gè)主要指標(biāo)。 它是指在每次轉(zhuǎn)移過(guò)程中,產(chǎn)生數(shù)量最大的有效繁殖體單位。 這些繁殖體單位必須大小一致,且能不斷增殖。促進(jìn)外植體增值的生長(zhǎng)素通常為細(xì)胞分裂素,與細(xì)胞分裂素配合使用的生長(zhǎng)素, 通常是 IAA 或IBA。 本研究以 MS 為基本培養(yǎng)基 , 附加 6-BA 和IBA,以不同濃度配比研究生長(zhǎng)素及濃度對(duì)外植體增殖的影響, 最終確定 MS 培養(yǎng)基附加 6-BA 1 毫克/升+ IBA0.1 毫克/升對(duì)外植體的增殖效果最好, 而且這種愈傷組織呈綠色、 緊密狀態(tài), 很容易產(chǎn)生不定芽。 草莓莖尖培養(yǎng)中若培養(yǎng)基適合,會(huì)出現(xiàn)質(zhì)地堅(jiān)硬的綠色瘤狀愈傷組織,表面平滑且有光澤,其增殖速度慢,并且連成一體;若培養(yǎng)基不合適,則往往出現(xiàn)黃白色的舒松軟綿的愈傷組織,其增殖速度快,象堆積在一起的球塊,一碰就散。 前者可進(jìn)一步分化出不定芽來(lái),后者則不能形成不定芽。
四、根的分化
外植體大量增殖后多數(shù)情況下生成無(wú)根苗,所以要誘導(dǎo)根。降低 MS 無(wú)機(jī)鹽濃度,有利于根的分化。本研究采用 MS 大量元素減半并附加 0.5 毫克/升IBA+0.1 毫克/升 NAA 誘導(dǎo)生根效果最好。 假如 NAA濃度偏高,組培苗在生根的同時(shí),基部會(huì)產(chǎn)生較多泡沫狀白色愈傷組織。 對(duì)已在增殖培養(yǎng)基內(nèi)生根的草莓苗,若要移入生根培養(yǎng)基,則應(yīng)將已發(fā)根的從根莖處切除,以利于重新發(fā)根,否則不但會(huì)影響新發(fā)根,老根也會(huì)因次生化而死亡。
草莓的組織培養(yǎng),謝謝圍觀。