發(fā)展植物組織培養(yǎng)的研究可以追溯到20世紀(jì)初期,根據(jù)其發(fā)展情況,大體可以分為三個時期。
1.萌芽階段
組織培養(yǎng)技術(shù)的蓬勃發(fā)展只是近50年的事,但它的整個歷史可以追溯至19世紀(jì)末和上世紀(jì)初。20世紀(jì)初,在Schleiden和Schwann所發(fā)展起來的細胞學(xué)說的推動下,1902年德國植物學(xué)家Haberlandt提出了高等植物的器官和組織為許多細胞組成的觀點,以及植物細胞全能性的理論,即植物的體細胞,在適當(dāng)?shù)臈l件下,具有不斷分裂和繁殖,發(fā)育成完整植株的潛在能力。他首次發(fā)表了植物離體細胞培養(yǎng)實驗的報告。1912年,Habefiandt的學(xué)生Kotte和美國的Robins在根尖培養(yǎng)中獲得了組織培養(yǎng)的成功。Kotte采用了無機鹽、葡萄糖、蛋白胨、天冬酰胺,及添加各種氨基酸的培養(yǎng)基。Robins用含無機鹽、葡萄糖或果糖的瓊脂培養(yǎng)基,培養(yǎng)了長度為1.45~3.75cm的豌豆、玉米和棉花的莖尖,形成了一些缺綠的莖和根。
2.奠基階段
自Haberlandt的實驗之后,直到1934年美國的White由番茄根建立了第一個活躍生長的無性繁殖系,并反復(fù)轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng),使根的離體培養(yǎng)實驗獲得了真正的成功,并在以后28年間培養(yǎng)了1600代。這之后,White又以小麥根尖為材料,研究了光、溫度、通氣、pH值、培養(yǎng)基組成等各種培養(yǎng)條件對生長的影響,并于1937年建立了第一個組織培養(yǎng)的綜合培養(yǎng)基,其成分均為已知化合物,包括3種B族維生素,即吡哆醇、硫胺素和煙酸,該培養(yǎng)基后來被定名為White培養(yǎng)基。與此同時,Gautherer(1934)在研究山毛柳和黑楊等形成層的組織培養(yǎng)實驗中,提出了B族維生素和生長素對組織培養(yǎng)的重要意義,并于1939年連續(xù)培養(yǎng)胡蘿卜根形成層獲得首次成功。同年,White由煙草種間雜種的瘤組織, Nobecourt由胡蘿卜均建立了與上述類似的連續(xù)生長的組織培養(yǎng)物。因此,Gautherer,White和Nobecourt一起被譽為組織培養(yǎng)學(xué)科的奠基人。我們所用的培養(yǎng)方法和培養(yǎng)基,基本上都是由這三位科學(xué)家建立的。后來,White于1943年發(fā)表了《植物組織培養(yǎng)手冊》專著,使植物組織培養(yǎng)開始成為一門新興的學(xué)科。
3.快速發(fā)展和應(yīng)用階段
40年代Skoog和崔徵在煙草莖切段和髓培養(yǎng)以及器官形成的研究中發(fā)現(xiàn),腺嘌呤或腺苷可以解除培養(yǎng)基中生長素(IAA)對芽形成的抑制作用,而能誘導(dǎo)形成芽,從而明確了腺嘌呤與生長素的比例是控制芽和根形成的主要條件之一。即這一比例高時,產(chǎn)生芽;這一比例低時,則形成根;相等則不分化。在尋找促進細胞分裂的物質(zhì)過程中,Miller等人于1956年發(fā)現(xiàn)了激動素。不久即知道激動素可以代替腺嘌呤促進發(fā)芽,并且效果可增加3萬倍。結(jié)果上述控制器官分化的激素模式變?yōu)榧铀嘏c生長素的比例關(guān)系。這方面的成功發(fā)現(xiàn),有力地推動了植物組織培養(yǎng)的發(fā)展。
1952年;Morel和Martin通過莖尖分生組織的離體培養(yǎng),從已受病毒侵染的大麗花中首次獲得無病毒植株。1935~1945年Muir把單細胞放在一張鋪在愈傷組織上面的濾紙上培養(yǎng),使細胞發(fā)生了分裂,即實施了看護接種技術(shù),使單細胞培養(yǎng)獲得初步成功。
1960年,Cocking等人用真菌纖維素酶分離植物原生質(zhì)體獲得成功。1971年,Takebe等在煙草上首次由原生質(zhì)體獲得了再生植株,這不僅在理論上證明了無壁的原生質(zhì)體同樣具有全能性,而且在實踐上為外源基因的導(dǎo)入提供了理想的受體材料。80年代中期以來,對禾谷類作物的原生質(zhì)體培養(yǎng)也相繼告捷,在這方面中國學(xué)者做出了重要貢獻。1962年印度Guha等人成功地在毛葉曼陀羅花藥培養(yǎng)中,由花粉誘導(dǎo)得到單倍體植株,從而促進了花藥和花粉培養(yǎng)的研究。
以后相繼在煙草、水稻、小麥、玉米、番茄、辣椒、草莓、蘋果等多種植物培養(yǎng)中獲得成功,其數(shù)目達到160多種,其中煙草、水稻和小麥等的花藥育種培養(yǎng)在中國取得了引入注目的成就。
1960年,Morel提出了一個離體無性繁殖蘭花的方法,其繁殖系數(shù)極高。由于這一方法有很大的應(yīng)用價值,很快被蘭花生產(chǎn)者所采用,迅速建立起蘭花工業(yè)。1973年Carlson等通過兩個煙草物種之間原生質(zhì)體融合,獲得了第一個體細胞雜種,Cocking等倡導(dǎo)的原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細胞雜交,研究得到了迅速發(fā)展,已經(jīng)能使矮牽牛和煙草屬的雜種細胞增殖分化生成雜種植株。
在整個植物組織培養(yǎng)發(fā)展的歷史中,我國學(xué)者做出多方面的貢獻,除了前述的崔徵的研究成效以外,還有1993年李繼侗等關(guān)于玉米等植物離體根尖培養(yǎng)的研究工作,以及羅士韋關(guān)于幼胚和莖尖培養(yǎng),李正理關(guān)于離體胚的研究培養(yǎng)、王伏雄等關(guān)于幼胚的研究培養(yǎng)工作。