百合是重要的切花、盆花和庭院用植物材料。傳統(tǒng)的百合繁殖方法如分球、分珠芽或鱗片扦插、鱗片包埋等,存在繁殖系數(shù)較小,多代繁殖常造成退化以及種間雜交不親合等問(wèn)題。采用組織培養(yǎng)進(jìn)行百合的快速繁殖和脫毒復(fù)壯,可促進(jìn)百合商品種球的生產(chǎn)和百合新品種的培育。
筆者以東方百合和亞洲百合為試材,采用鱗片作為外植體,研究不同濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑配比對(duì)兩種百合不定芽的誘導(dǎo)、芽的增殖和生根的影響,并摸索組培苗移栽的適宜條件,篩選出適合各階段的培養(yǎng)基及移栽基質(zhì)。
不同培養(yǎng)基對(duì)不定芽分化的影響
剝?nèi)o(wú)菌苗小鱗莖中間層小鱗片,切取鱗片基部約0.5~0.8cm2大小的方塊作為外植體,接種于添加不同濃度6-BA和NAA的MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基上培養(yǎng),觀察不同濃度6-BA和NAA對(duì)鱗片不定芽分化的影響。培養(yǎng)10天后,外植體基部表面不同程度地出現(xiàn)了小突起,3~4周時(shí)部分小突起發(fā)育成不定芽,不定芽的發(fā)生情況見(jiàn)表1和表2。
由表1可以看出,東方百合鱗片在不添加任何植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的MS培養(yǎng)基上也有不定芽的發(fā)生,但是芽再生率較低且再生芽生長(zhǎng)較弱。添加適量的6-BA與NAA有利于不定芽的誘導(dǎo)。6-BA濃度為0.1mg/L時(shí),所有組合都獲得100%芽再生率,平均每個(gè)外植體獲得的不定芽數(shù)在NAA濃度為0.5mg/L時(shí)最多,為3.5個(gè)。6-BA濃度達(dá)到0.5mg/L時(shí),不定芽呈叢狀生長(zhǎng),生長(zhǎng)較弱。
對(duì)于亞洲百合,由表2可以看出,不同濃度6-BA和NAA配比,芽再生率及平均每個(gè)外植體再生的不定芽數(shù)不同。6-BA與NAA的比值大于或等于1.0時(shí),芽再生率較高,在6-BA濃度為1.0mg/L、NAA濃度為1.0mg/L時(shí)達(dá)到最高,為100%。6-BA濃度低于1.0mg/L,NAA濃度低于6-BA濃度時(shí),不定芽的再生情況較好,兩者的濃度都為0.5mg/L或1.0mg/L時(shí)獲得較多生長(zhǎng)健壯的不定芽,分別為4.0和4.3;6-BA濃度達(dá)到1.5mg/L,不定芽生長(zhǎng)較弱,并且出現(xiàn)不同程度的玻璃化現(xiàn)象。與亞洲百合相比,東方百合小鱗片不定芽分化在添加較低濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上即可獲得較好的結(jié)果,在本研究中,最適培養(yǎng)基為MS+0.1mg/L6-BA+0.5mg/LNAA,而亞洲百合小鱗片不定芽分化的最適培養(yǎng)基為MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA。
東方百合和亞洲百合鱗片組培試驗(yàn),希望能與大家多多交流,謝謝!