一、首先將內(nèi)層滅菌桶取出，向外層鍋內(nèi)加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。

二、放回滅菌桶，裝入待滅菌物品。關(guān)閉鍋蓋，檢查排氣閥、安全閥狀態(tài)（全自動滅菌鍋不需要）；注意事項：

1、物品不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果。

2、三角燒瓶與試管口不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。

3、滅菌空且較深的容器時，將容器橫放使蒸汽可以進(jìn)入，正放會使滅菌效果下降。

4、滅菌液體培養(yǎng)基或溶液時，容器內(nèi)液體液面不易過高，否則會在升溫、降溫過程中溢出。三角瓶不宜超過四分之三，試管不宜超過二分之一。除非使用在加熱條件下可以透氣的塑料容器蓋等，不允許空氣透過的容器蓋會使容器破裂。

5、對不同類型和不同滅菌物，切勿放在一起滅菌，以免造成損失。

三、打開電源，檢查參數(shù)設(shè)置是否正確，然后按下“work”鍵，滅菌鍋開始工作；

自動排冷氣，到105℃時，底部排氣閥門自動關(guān)閉，然后壓力開始上升；

四、壓力升至0.15MPa（121℃）時，滅菌鍋再次自動放氣，然后開始記時，一般培養(yǎng)基滅菌20min，蒸餾水滅菌40min；

五、達(dá)到規(guī)定的滅菌時間后，關(guān)閉電源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降；當(dāng)壓力指針降至0.00MPa時，打開放氣閥，使外界空氣進(jìn)入滅菌鍋后方可開啟鍋蓋。如果壓力未降到0時，打開排氣閥，就會因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。

六、注意事項

1、鍋內(nèi)必須要有充足的水；

2、鍋的氣密性一定要很好；

3、壓力表指針在0.05MPa以上時，不能過快放汽，以防止壓力急速下降，液體滾沸，從培養(yǎng)容器中溢出；

4、汽未放盡前，不得開啟高壓鍋；

5、如果滅菌后的培養(yǎng)基在鍋內(nèi)不及時拿出，需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開，切忌將培養(yǎng)基封閉在鍋內(nèi)過夜；

6、操作過程，請注意安全，小心燙傷。

組培設(shè)備-高壓滅菌鍋的正確使用方法，希望對您有參考價值。