中國蘭花主要是蘭科蘭屬中的地生蘭,是我國傳統(tǒng)名花。她芬芳清麗、婀娜多姿、高雅幽香。中國蘭大致可分為春蘭、蕙蘭、建蘭、墨蘭、寒蘭等幾類。傳統(tǒng)的繁殖方法為分株繁殖、繁殖系數(shù)低,而且無性繁殖病毒嚴(yán)重,引起劣變。國蘭組織培養(yǎng)主要是莖尖培養(yǎng)進(jìn)行快速繁殖,以及種子無菌播種用以雜交育種。
1. 莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)
取6-13cm長的新芽→從植株基部切離→去除雜物→洗凈、切成2-3cm的段→10%次氯酸鈉溶液消毒10min→無菌水沖洗→無菌濾紙吸干→解剖鏡下取莖尖和腋芽,脫毒取莖尖≦0.2mm,培養(yǎng)則取2mm以上,莖芽帶2-3葉原基→固體培養(yǎng)基培養(yǎng)。
2. 原球莖的誘導(dǎo)
(1) 春蘭莖尖或側(cè)芽→接種于改良的MS+NAA5+10%CM的培養(yǎng)基→20~25℃黑暗條件下培養(yǎng)1-2個(gè)月→乳白色原球莖→光照9~10h/d→三周后原球莖變綠→轉(zhuǎn)移至MS+MS+NAA2.5+10%CM培養(yǎng)基上→1.5月后→綠色原球莖;
(2) 建蘭和秋蘭莖尖分生組織或側(cè)芽→接種于White+ NAA5+10%CM的培養(yǎng)基→25℃黑暗條件下培養(yǎng)1-2個(gè)月→原球莖
(3) 蕙蘭莖尖(2~3cm)→接種于KC+NAA1+KT0.1培養(yǎng)基上→30d形成原球莖→分化芽→轉(zhuǎn)移至KC+IBA0.5培養(yǎng)基上→長根→形成完整苗;
在培養(yǎng)過程中莖尖頂端若用解剖刀或針損傷后,其基部可以生成更多原球莖形成的原球莖若切塊繁殖在原來的培養(yǎng)基上10~15天后就可增殖出數(shù)個(gè)原球莖。
從大多數(shù)品種的培養(yǎng)上看春蘭類似無機(jī)鹽和和銨態(tài)氮含量低而生長勢高的培養(yǎng)基為好。國蘭莖尖培養(yǎng)褐變較嚴(yán)重,所以在切割外植體時(shí),不應(yīng)切太小。
原球莖的增殖
原球莖可經(jīng)過不斷的切割而增值,國蘭的原球莖增殖以固體、液體培養(yǎng)交替進(jìn)行,也可進(jìn)行固體培養(yǎng)。
3. 成苗與壯苗
可將原球莖轉(zhuǎn)入B5+NAA0.2+BA2.5培養(yǎng)基上,在25℃、1000lx光照10-16h下,不久便可分化出根芽,而形成完整的植株,國蘭植株一般需要壯苗培養(yǎng)才可出瓶移栽。
國蘭莖尖組織培養(yǎng)技術(shù),希望能與大家多多交流,謝謝!