組培室建設(shè)可不是想建房子那樣簡(jiǎn)單,在前面一期文章里談過(guò)類(lèi)似的問(wèn)題,但是僅僅從幾個(gè)比較淺顯的方面出發(fā)。下面就從整個(gè)組培技術(shù)方面談一談。
組織培養(yǎng)苗生產(chǎn)車(chē)間是組培育苗的核心。植物組織培養(yǎng)育苗,包括培養(yǎng)基的制備、消毒滅菌、接種、增殖培養(yǎng)和生根誘導(dǎo)等若干步驟。按各步驟的要求,組培苗各生產(chǎn)車(chē)間可按流水作業(yè)排列設(shè)計(jì),可分為更衣間、藥品間、洗滌間、培養(yǎng)基消毒制作間、培養(yǎng)基礎(chǔ)備間、緩沖間、紫外消毒間、接種間、大培養(yǎng)間和小培養(yǎng)間等。組培苗的規(guī)模要求。隨著計(jì)劃生產(chǎn)規(guī)模的不同,各作業(yè)間的大小可根據(jù)需要變動(dòng)。如果為了節(jié)省用地,也可以改成樓層設(shè)計(jì),但是,必須增加電梯吊裝設(shè)備,并考慮各作業(yè)間之間流水作業(yè)的便捷。此外,除以上所提作業(yè)間外,還應(yīng)考慮在附近設(shè)置辦公室、衛(wèi)生間和雜品貯藏庫(kù)等。有條件的還應(yīng)考慮冷藏庫(kù),用以暫時(shí)存放原種材料和待出庫(kù)移栽的組培苗,以及某些需要低溫處理的材料如百合等。
第一,更衣間更衣間是工作人員進(jìn)入組培苗生產(chǎn)車(chē)間的第一道門(mén)戶(hù)。為防止外界塵土和污染物的帶入,凡進(jìn)入組培苗生產(chǎn)車(chē)間的工作人員必須在此換鞋和更換潔凈的工作服。更衣間內(nèi)應(yīng)設(shè)置衣柜(架)和鞋柜及洗手池。日常應(yīng)保持室內(nèi)整潔,并經(jīng)常進(jìn)行工作服和拖鞋的清洗。室內(nèi)除正常安裝一般照明燈外,還可以安裝紫外消毒燈,以便定期進(jìn)行室內(nèi)消毒。
第二,洗滌間洗滌間主要用于清洗各種培養(yǎng)器皿和用具等,必須保證有通暢潔凈的水源、洗滌池和排水系統(tǒng)。洗滌間內(nèi)配備必須的洗滌用具(各種型號(hào)適用的洗瓶刷、試管刷等)、洗滌劑和洗滌架或洗滌筐等,有條件的可配備洗瓶機(jī)和消毒柜等。為便于器皿的運(yùn)輸,還應(yīng)配備一定數(shù)量的醫(yī)用手術(shù)藥械移動(dòng)小推車(chē)(以下簡(jiǎn)稱(chēng)小推車(chē),)。在洗滌間內(nèi)還應(yīng)配備蒸餾水和純凈水制備裝備,以供培養(yǎng)基母液制備和制作培養(yǎng)基用水。制備培養(yǎng)基母液最好用純凈的蒸餾水,制作生產(chǎn)性培養(yǎng)基時(shí)可用一般純凈水,所謂純凈水的最低水質(zhì)要求是水的電阻值應(yīng)大于200歐姆。
第三,藥品間藥品間內(nèi)主要存放組培生產(chǎn)常用的化學(xué)試劑,如各種無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)物、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、消毒劑及各種生化試劑等。室內(nèi)要求保持干燥、整潔,各種藥品排放整齊、有序,避免陽(yáng)光直射。室內(nèi)需配置藥品柜、干燥器、冰箱等,因?yàn)橛行┧幤罚绕涫羌に仡?lèi)和一些有機(jī)、生化試劑及其配制的培養(yǎng)基母液必須低溫保存。此外,室內(nèi)還必須配置水泥臺(tái),擺放萬(wàn)分之一的分析天平,以便稱(chēng)取激素、微量元素等藥品。特別需要提出的是對(duì)一些有毒藥品,如升汞等,必須嚴(yán)格保管,建立藥品使用登記責(zé)任卡,以免發(fā)生意外事故。
第四,培養(yǎng)基制作、消毒間該作業(yè)間的面積一般需要稍大些,室內(nèi)可按培養(yǎng)基的制備、分裝、消毒的流水作業(yè)程序安排布置。室內(nèi)要配置實(shí)驗(yàn)臺(tái)和必要的儀器設(shè)備,如1/10至1/100 感量的天平、冰箱(保存母液等)、pH計(jì)、攪拌器、移液管、量筒、定量分液器、大容量容器、小推車(chē)和高壓消毒鍋等等。為便于培養(yǎng)基消毒的操作,應(yīng)根據(jù)消毒鍋大小和類(lèi)型(立式或臥式)制作合適的耐高溫的鐵筐或塑料筐以便放置培養(yǎng)瓶。由于高壓消毒鍋的用電量極大,在建筑設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)考慮用電負(fù)荷設(shè)置專(zhuān)線。此外,還需注意安裝室內(nèi)的排氣裝置,以便排除由高壓鍋排放出來(lái)的蒸汽。
第五,培養(yǎng)基貯備,間經(jīng)過(guò)消毒后的培養(yǎng)基及無(wú)菌紙和用具等存放于此室備用。室內(nèi)可配備一定數(shù)量的貨架(柜)。存放的培養(yǎng)基必須嚴(yán)格標(biāo)明培養(yǎng)基代號(hào)及消毒日期,并且排放整齊、有序。室內(nèi)宜保持較低的溫度和避免陽(yáng)光直射,并應(yīng)安裝紫外消毒燈,以便經(jīng)常對(duì)室內(nèi)環(huán)境進(jìn)行消毒殺菌。
第六,紫外消毒間,從培養(yǎng)間取來(lái)準(zhǔn)備進(jìn)行繼代培養(yǎng)的材料,或從外單位引入的試管種苗在進(jìn)入接種室前,為減少瓶外的污染源帶入接種間,一般需要先在此室內(nèi)用紫外線消毒立方米的空間安裝一支分鐘。如果是塑料袋培養(yǎng)的袋裝苗,則應(yīng)先用消毒劑擦洗塑料袋。消毒間內(nèi)除需配置一些培養(yǎng)架外,必須安裝紫外消毒燈,一般可按每波長(zhǎng)外,必要時(shí)也可以熏蒸消毒殺菌接種間接種間是進(jìn)行外植體接種、試管苗切割增殖和試管內(nèi)誘導(dǎo)生根等無(wú)菌操作的場(chǎng)所,對(duì)環(huán)境的無(wú)菌條件要求較高。
第七,緩沖間,為防止外界氣流的直接侵入,在接種間的入口處必須加設(shè)緩沖間,緩沖間內(nèi)應(yīng)設(shè)衣柜和鞋柜,供接種工作人員更換工作服和鞋、帽、口罩等用。緩沖間內(nèi)應(yīng)隨時(shí)保持整潔,并定期用紫外燈或熏蒸消毒。還應(yīng)配置洗手池,供接種工作人員工作前洗手用。接種間的地面、墻面和吊頂必須光滑潔凈,便于清洗且不沾塵土。有窗戶(hù)時(shí),窗戶(hù)的密閉性必須良好,避免外界塵土侵入。
第八,接種間內(nèi)根據(jù)需要應(yīng)配置一定數(shù)量的超凈工作臺(tái)。實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)表明,為便于接種工人的操作和提高接種的工作效率。布置超凈工作臺(tái)時(shí)必須注意防止各超凈工作臺(tái)的氣流的相互干擾,并應(yīng)考慮室內(nèi)物品運(yùn)送和各項(xiàng)操作的方便,以便提高工作效率。超凈工作臺(tái)上應(yīng)配備接種用的工具(解剖刀、鑷子等)和消毒用的酒精瓶及酒精燈(或高溫焚化爐)等。超凈臺(tái)下應(yīng)放置污物桶,以便存放接種過(guò)程中的丟棄物,污物桶必須每天清洗更換。接種間內(nèi)除需配置一定數(shù)量的紫外消毒燈外,還應(yīng)配備一定的防火設(shè)備,以防萬(wàn)一。
第九,培養(yǎng)間。培養(yǎng)間是培養(yǎng)組培苗的關(guān)鍵場(chǎng)所之一,要求有一定的控溫和控光設(shè)備,以保證試管苗生長(zhǎng)所需的溫度和光照(光周期)條件。以前許多人認(rèn)為在恒溫下組培苗生長(zhǎng)最好,但是實(shí)際上對(duì)許多作物來(lái)說(shuō)并非如此,組培苗在這種晝夜有溫差的條件下要比在恒溫條件下生長(zhǎng)健壯得多。當(dāng)然,適宜的培養(yǎng)溫度因作物種類(lèi)和培養(yǎng)階段不同而異,必須根據(jù)需要加以調(diào)控。譬如,一些南方的花卉(綠巨人、花葉芋、竹芋、巴西木等)需要較高的培養(yǎng)溫度,而有些有夏休眠特性的花卉植物(如仙客來(lái)、翡翠珠等)常常需要稍低的溫度,光照強(qiáng)度在段是采用空調(diào)器,在較小面積的培養(yǎng)間內(nèi)可以用窗式或柜式的冷暖型空調(diào),如果培養(yǎng)間面積較大,最好采用中央空調(diào),以保證培養(yǎng)間內(nèi)各部位溫度相對(duì)均衡。在培養(yǎng)間的多個(gè)代表部位應(yīng)放置溫度表或自計(jì)溫度儀。培養(yǎng)間內(nèi)的光照,通常是采用培養(yǎng)架上的日光燈照明,并用定時(shí)控制器來(lái)控制光周期。對(duì)一般植物而言,光照時(shí)間每天2000-3000勒左右已經(jīng)足夠。安裝日光燈時(shí)最好選用電子整流器,發(fā)熱量小。如果采用普通鐵芯式的整流器,為避硬鐵絲網(wǎng)間隔,每層配置整流器發(fā)熱影響培養(yǎng)間內(nèi)的溫度控制,最好將它安裝在培養(yǎng)間外面的通風(fēng)處。培養(yǎng)架是培養(yǎng)間內(nèi)主要設(shè)備,是擺放組培材料的場(chǎng)所。通?捎描F或鋁合金制作,根據(jù)培養(yǎng)間房屋的高度,一般設(shè)5-7層,層間距為50-60厘米左右,每層寬2-3支40瓦的日光燈管。為便于運(yùn)送和安放培養(yǎng)瓶等作業(yè),培養(yǎng)間內(nèi)還必須準(zhǔn)備一定數(shù)量的小推車(chē)和折疊梯子。
由于許多植物在組培誘根階段常需一定時(shí)間的暗培養(yǎng),因此,在設(shè)計(jì)培養(yǎng)間時(shí)也可以考慮安排一個(gè)暗培養(yǎng)間。為了節(jié)約起見(jiàn),也可以準(zhǔn)備一些用紅、黑雙層布縫制的遮光被,需要時(shí)將培養(yǎng)瓶包裹起來(lái)進(jìn)行必要的暗培養(yǎng)。但這種方法的缺點(diǎn)是較難單獨(dú)調(diào)控溫度。因?yàn)橛行┲参镌谡T導(dǎo)生根的前幾天常需要較高的溫度。
培養(yǎng)間還必須根據(jù)空間大小,配置一定數(shù)量的紫外消毒燈,以便定期對(duì)培養(yǎng)間進(jìn)行消毒殺菌。培養(yǎng)間內(nèi)由于燈管數(shù)量較多,用電量很大,設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)考慮用電負(fù)荷,設(shè)置專(zhuān)線和配電設(shè)備。為盡可能地減少培養(yǎng)間的電耗,降低生產(chǎn)成本,在設(shè)計(jì)培養(yǎng)間時(shí),可考慮加大窗戶(hù)增加采光,縮小房間的深度,以充分利用自然光(散射光),而以日光燈作為補(bǔ)充光源。要想提高生產(chǎn)效率,還有很多細(xì)節(jié)需要把控。